1、临床实验室生物安全导则卫生部临床检验中心申子瑜病原微生物实验室安全管理条例病原微生物实验室安全管理条例（征求意见稿）（征求意见稿）第一章第一章 总总 则则 为了加强病原微生物实验室(以下称实验室)安全管理，保护实验室工作人员和公众的健康，制定本条例。 本条例所称病原微生物：是指能够使人或者动物致病的微生物。 条例目标及适用范围保护实验室工作人员、社会公众和环境适应于从事病原微生物研究、教学、生产、诊断检测等所有实验室 国家对病原微生物按照其对人类和动物以及环境的危害程度实行分类管理，对实验室根据其对病原微生物的防护水平实行分级管理。 国家实行统一的实验室生物安全标准。 病原微生物的分类和管理l
2、 l、 国家将病原微生物分为四类国家将病原微生物分为四类2 2、第三类、第四类称为高致病性病原微生物、第三类、第四类称为高致病性病原微生物3 3、卫生部负责制定并调整四类病原微生物、卫生部负责制定并调整四类病原微生物 的种类的种类 第一类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人或者动物疾病的微生物。 第二类病原微生物，是指能够引起人或者动物疾病，发生实验室暴露可能引起感染，但不会引起严重危害，且能够有效实施预防和治疗的微生物。 第三类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，但不易在人或者动物间传播，且能够有效实施预防和治疗的微生物。 第四类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，容易
3、在人或者动物间传播，或者没有有效的预防和治疗措施的微生物。 第三类、第四类病原微生物统称为高致病性病原微生物。 国家根据实验室防护水平，将实验室分为一级、二级、三级、四级。 临床诊断、检测检验工作可以在二级实验室中进行。但是，发现高致病性病原微生物的其病原学的分离鉴定工作应当转移到三级以上的实验室中进行。中华人民共和国国家标准 GB 19489-2004实验室 生物安全通用要求一、实验室生物安全防护分级一级生物安全防护实验室，简称一级生物安全防护实验室，简称BSL1BSL1或或P1P1二级生物安全防护实验室，简称二级生物安全防护实验室，简称BSL2BSL2或或P2P2三级生物安全防护实验室，简
4、称三级生物安全防护实验室，简称BSL3BSL3或或P3P3四级生物安全防护实验室，简称四级生物安全防护实验室，简称BSL4BSL4或或P4P4一级生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病对健康成年人已知无致病作用作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。二级生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在对人或环境具有中等潜在危害危害的微生物。三级生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。
5、 艾滋病毒的研究（血清学实验室除外）应在三级生物安全防护实验室中进行。 四级生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素微生物及其毒素。二、二级生物安全防护实验室二、二级生物安全防护实验室安全设备和个体防护安全设备和个体防护1.可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜柜(级级生物安全柜生物安全柜为宜为宜)或其
6、他物理抑制设备中进行，并使用或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。个体防护设备。2.处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜(级生级生物安全柜为宜物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。设备。上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或安全离心杯，上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或安全离心杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可在实验且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可在实验室中进行。室中进行。3.当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须
7、采取外部操当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备备)。4 . 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。验室中消毒
8、，然后统一洗涤或丢弃。5. 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。用。三、实验室设计和建造的特殊要求1.每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。2.实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙。实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应
9、防滑、无缝隙。3.实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。4.实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台(架架)。5.实验室应有可开启的窗户，应设置纱窗。实验室应有可开启的窗户，应设置纱窗。6.在实验室所在的建筑内应高压蒸汽灭菌器，并按期检查和在实验室所在的建筑内应高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。验证，以保证符合要求。7.应设置洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。应设置洗眼设施，必要时应有应急喷淋装
10、置。8.实验室门宜带锁、可自动关闭，门有可视窗。实验室门宜带锁、可自动关闭，门有可视窗。9.实验室出口应有在黑暗中可明确辨识的标识。实验室出口应有在黑暗中可明确辨识的标识。10.应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。二级生物安全防护实验室操作要点1.实验室人口须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进人实验室的特殊要求及离开实验室的程序；2.禁止非工作人员进人实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入；3.禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物；4.接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和
11、离开实验室前要洗手；5.以移液器吸取液体，禁止口吸；6.制定尖锐器具的安全操作规程； 7.按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生；8.每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒；9. 所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭防漏的容器内储存、运输及消毒灭菌；10.如有条件工作人员应接受必要的免疫接种 (如卡介苗等)；11.必要时收集从事危险性工作人员的基本血清留底，并根据需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时处理；12.将生物安全程序纳入标准操作规范或生物安全手册，由实验室负责人专门保管，工作人员在进入实验室之
12、前要阅读规范并按照规范要求操作；13.工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训；14.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒；15.人员暴露于病毒时，及时向实验室负责人汇报并记录。安全管理制度实验室内务管理制度尖锐器具安全使用制度实验室消毒防护制度标本采集运输制度废弃物处理制度工作人员防护制度差错事故处理制度尖锐器具安全使用制度除特殊情况外，禁止在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。尽可能应用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽、从注射器取下，禁止用手直接操作。用过的针头必须直接放入防穿透的
13、容器中。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。尽可能使用无针注射器和其他安全装置。禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须消毒。四、为何需使用生物安全柜?考虑对操作人员，操作样品，操作环境的保护。美国国家卫生研究院NIH标准与美国国家疾病控制中心CDC实验室生物安全级别标准中要求：应用于临床、诊断、教学、研究、或者生产设施，开展有关内源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入该病源, 会引发严重的、可能致死的疾病。1.需使用ClassII级生物安全柜2.实验人员受过专业训练3.应有管道化的排气系统，排出的空气不再循环至建筑物内的任何
14、其他区域。 4.建议生物安全柜每年经过测试和确证 生物安全设备分类1.超净台 2.抽风橱3. CLASS I 一级生物安全柜 4.CLASS II 二级生物安全柜 5. CALSS III三级生物安全柜（又称手套柜）1、超净台正压柜气流从顶部或底部经过过滤器后从操作区正面流向工作台面，被样品污染的气流排出柜外，没有循环气流。超净台保护样品不受污染，适用于普通实验室适用于普通实验室或或1 1级生物安全水平中级生物安全水平中对对人员和环境无保护要求人员和环境无保护要求的实验的实验。 2、CLASS I一级生物安全柜负压柜气流经操作人员向内进入工作台面，被污染的气流通过HEPA过滤器外排出柜外，没有
15、循环气流。CLASS I级BSC保护操作人员和环境不受污染，适用于适用于生物安全水平中生物安全水平中对实验样品对实验样品无保护要求的实验。无保护要求的实验。 3、CLASS II 二级生物安全柜层流负压柜 它们可以安全的保护样品、人员和环境它们可以安全的保护样品、人员和环境。II 级生物安全柜分为A型（30%排在室内 ）和 B型；B型中又分为B1 （70%接管道外排） 、 B2 （100%接管道外排） 、 B3 （30% 接管道外排） 。 CLASS II A生物安全柜（1）进入气流最低流速平均为0.38米/秒)；（2）3030% %气气流流经经HEPAHEPA过过滤滤后后外外排在室内排在室内
16、；（3）被污染的管道和气流通道为正压状态生物安全柜空气流向 CLASS II B1生物安全柜（1）进入的气流最低流速平均为0.5米/秒；（2）70%70%气气流流通通过过专专用用的的管管道道经经HEPAHEPA过过滤滤后后接接管管道道外外排排至至室室外外；（3）所有受生物污染的管道和气流通道均在负压状态下或被负压的管道或气流通道包围。CLASS II B2生物安全柜（1）进入气流最低流速平均为0.5米/秒；（2）所有向内进入的气流和向下的气流均通过HEPA过滤后排到室外而不在柜内循环，也不能排入实验室；100%100%接管道外排接管道外排。（3）所有的被污染的管道和气流通道都在负压状态下或被直接外排的负 压管道或气流管道所包围。CLASS II B3生物安全柜（1）进入的气流最低流速为0.5米/秒；（2）外外排排到到室室外外的的气气流流（30%30%）经过经过HEPAHEPA高效过滤；高效过滤；（3）所有经生物污染的管道和气流通道均为负压状态；（4）与CLASS II A型气流方向相同，但与CLASS A型不同的是，它30%30%外排气是接管道外排气是接管道排到室外的排到室外的。 II
